第767章 767.锁定（2 / 2）

研究免疫球蛋白以探讨体液免疫的复杂性

免疫球蛋白存在于肿瘤和血清中，在肿瘤中起双重作用。抗体通过其片段可结晶(Fc)支配功能，并受翻译后修饰调控。通常，免疫球蛋白是由骨髓和脾脏的浆细胞(PCs)分泌的。组织炎症区域和肿瘤内部的pc，特别是在三级淋巴结构(TLS)中，分泌肿瘤相关抗体并直接在肿瘤上诱导原位效应。在抗肿瘤功能方面，IgG是最重要的一类人免疫球蛋白，因为它能够结合巨噬细胞和自然杀伤细胞上的Fcγ受体，并促进ADCC、ADCP和CDC的作用。此外，IgG对抗原处理和呈递至关重要，因为抗原呈递细胞(APCs)上的Fcγ受体可以与IgG包被的免疫复合物结合，激活T细胞。抗体和抗体分泌细胞(APCs)的单细胞测序有助于进一步明确B细胞体液免疫的复杂网络。已经报道了一种单细胞液滴微流控测序方案，用于特异性结合靶细胞的抗体，这也适用于初级人类PC。CelliGO是一种液滴微流体系统，用于高通量单细胞筛选分泌IgG的原代细胞，一方面，通过基于荧光的液滴内单细胞生物测定检测IgG活性，另一方面，用barcoded反转录对配对的V基因进行测序。

外周血未成熟B细胞通过高内皮静脉进入B淋巴滤泡。在B细胞滤泡中，na?veB细胞(CD27)通过固有apc(包括DCs和滤泡树突状细胞(FDCs))接触抗原，之后激活BCR信号诱导抗原提取、内化和加工，将肽呈现在MHCII上。然后，B细胞迁移到与T细胞相邻的滤泡区边缘，将抗原呈递给滤泡辅助T(Tfh)细胞。因此，Tfh细胞刺激BCR，诱导na?veB细胞分化，主要包括记忆B细胞(MBCs)、短命B细胞(short-livedPCs)和生发中心(germinalcenter，GC)B细胞。这些不依赖GC的MBCs表达RGS13，可能增加GC抗性。此外，它们缺乏B细胞进入和离开GCs的CCR7和GPR183。为了分化为GCB细胞，它们首先进入GC的暗区(darkzone，DZ)，在那里它们的膜表面免疫球蛋白通过体细胞高突变(somatichypermutation，SHM)发生变化，称为亲和成熟。接下来，它们在亮区(LZ)经历一个竞争过程，在那里许多B细胞聚集，它们的命运取决于它们与Tfh细胞的相互作用，可能有能力捕获和呈现抗原，并发生类转换重组(CSR)。这个过程也依赖于Tfh细胞分化的结果，导致B细胞的结果。低亲和性B细胞成为长寿命MBCs，高亲和性B细胞成为PCs，其他细胞凋亡或重新进入****Z进行SHM和克隆扩增。最近的研究表明，cMyc+LZB细胞亚群包括亲和力较高的PC前体或未来的DZ进入者，以及一些亲和力较低的MBC前体。值得注意的是，BCR在这个过程中起主要作用，B细胞分化的体液免疫过程中两个重要的检查点是na?veB细胞和GCB细胞上的抗原提呈，这可能会提高体液免疫应答。此外，在单细胞水平上的完整转录组字符化将特别有助于确定na?veB细胞向PC分化过程中的转录轨迹和异质性。

B细胞分布不均一

以往对B细胞的研究主要基于免疫组化或流式细胞术，限制了B细胞的清晰分类。Wouters等人回顾了69项研究，研究tilb在19种癌症中的预后意义，以探索B细胞对抗肿瘤免疫贡献的不确定性，其中B系细胞的预后意义不同。有研究发现B细胞激活髓样细胞上的FcRγ受体，促进鳞状细胞的癌变。然而，带有抗cd20抗体的B细胞耗竭促进小鼠中黑色素瘤的发生。到目前为止，B细胞在肿瘤中的功能尚不清楚。这主要是由于在不同的组织中存在不同的B细胞亚群，在分类、功能和空间上。scRNA-seq的应用提供了高分辨率，可以揭示不同组织间分布的不确定性和不均匀性，从而揭示免疫原性或免疫抑制性TME。通常，B细胞只占正常人体器官细胞组成的一小部分。例如，B细胞在正常胰腺组织中是有限的(amp;1%)，但在胰腺癌中约占5%。在原发肺肿瘤中，B细胞也比正常肺组织增加。此外，正常肺组织中浸润的多为分泌GranzymeB的细胞毒B细胞，而在原发性肺肿瘤和淋巴结转移中，由于肿瘤抗原的克隆扩增和生成，不同bcr的GCB细胞增多。同样，与正常乳腺组织相比，原发性乳腺癌中TIL-Bs密度增加。此外，在乳腺癌中，TIL-Bs比B细胞在次级淋巴组织中表达更多的Th1效应细胞因子(IFNG和TNFA)，提示1型细胞免疫应答。在一个三阴性乳腺癌(TNBC)队列中，scRNA-seq证据显示，TME中的B细胞具有更多的SHM和CSR的MBCs特征，而PBMCs则富含更多的na?veB细胞。这可能是因为原发性肿瘤发生时，外周血中大量na?veB细胞受到高质量肿瘤新抗原的刺激，在GCs中发生SHM，从而迁移到TME或TLS。然而，通过scRNA-seq分析，与癌旁组织和癌前组织相比，人类CRC组织的增殖状态更高，分散程度更高，MHCII类基因评分更低，抗原呈递能力更低，提示CRC存在不同的免疫抑制TME。